کشت سلول یکی از اساسیترین و پرکاربردترین روشها در علوم سلولی و مولکولی است که امکان بررسی دقیق رفتار، رشد و پاسخ سلولها را در شرایط کنترلشده آزمایشگاهی فراهم میکند. در اگزوبایوژن، خدمات کشت سلولی شامل سلولهای پرایمری انسانی و حیوانی، خطوط سلولی سرطانی و سلولهای بنیادی ارائه میشود. این خدمات به پژوهشگران امکان میدهد تا نتایج دقیق، تکرارپذیر و قابل اعتماد برای مطالعات زیستشناسی سلولی، مولکولی، بیوشیمیایی و داروشناسی بهدست آورند.
تمامی مراحل کشت، پاساژ و فریز/دفریز در محیطهای استریل و ایزوله (هود کلاس II) انجام میشود تا از آلودگی میکروبی و قارچی جلوگیری شود. انکوباتورها، هودها و سایر تجهیزات بهطور منظم کالیبره و مانیتورینگ میشوند تا دما، رطوبت و غلظت گازها دقیقاً در محدوده استاندارد نگه داشته شوند. کنترل pH محیط با استفاده از فناوری بافرینگ مدیا و CO₂ انجام میشود. تمامی دادهها، از تعداد سلولها تا وضعیت مورفولوژی و شرایط فریز/دفریز، بهصورت مستند و مطابق با استانداردهای علمی بینالمللی ثبت میشود./p>
برای نگهداری طولانیمدت، سلولها پس از شمارش و ارزیابی سلامت، با محلولهای کریوپروتکتیو حاوی DMSO و سرم مناسب آماده فریز میشوند. فریز کنترلشده: با استفاده از کریوکنترلر یا فریزرهای سلولی، دما به آرامی کاهش مییابد تا ایجاد یخ کریستالی داخل سلولها کاهش یابد و آسیب سلولی به حداقل برسد. دفریز: سلولها به آرامی در دمای 37°C بازسازی میشوند و پس از شستشو و حذف DMSO، مجدداً در انکوباتور CO₂ با دمای کنترلشده، رطوبت بالا و غلظت CO₂ حدود 5٪ قرار میگیرند تا شرایط طبیعی رشد سلولها بازسازی شود./p>
فرآیند نگهداری سلولها شامل پاساژ منظم است تا از تراکم بیش از حد جلوگیری و شرایط رشد بهینه حفظ شود. سلولهای پرایمری: این سلولها از بافتهای اولیه استخراج میشوند و بسیار حساس به تغییرات محیطی هستند. پاساژ باید با ملایمت انجام شود تا سلولها آسیب نبینند. سلولهای سرطانی: این لاین های سلولی معمولاً رشد سریع دارند و نیازمند کنترل دقیق تراکم، pH و ترکیبات محیط کشت هستند تا از تغییرات متابولیکی غیرمطلوب جلوگیری شود. سلولهای بنیادی: سلولهای تمایزنیافته و پرتوان نیازمند محیطهای خاص غنیشده با فاکتورهای رشد اختصاصی و پروتکلهای تمایز کنترلشده هستند تا توانایی تمایزی و بقاء طولانیمدت حفظ شود. تمامی سلولها در مدیاهای اختصاصی شامل ترکیب پایه (DMEM, RPMI یا α-MEM بسته به نوع سلول)، سرم (FBS یا سرم انسانی)، فاکتورهای رشد، آنتیبیوتیکها و در صورت نیاز مواد مکمل متابولیکی نگهداری میشوند. شمارش سلول با روش متیلن بلو و لام نئوبار انجام میشود. همچنین مورفولوژی سلولها در فواصل زمانی مشخص با میکروسکوپ فازکنتراست تحت بررسی قرار میگیرد./p>
