تست Scratch Assay یا تست بهبود زخم، یک روش ساده و موثر برای ارزیابی توانایی مهاجرت و تکثیر سلولها در پاسخ به آسیب است. در این تست، یک لایه یکنواخت از سلولها در یک صفحه کشت ایجاد میشود و سپس با استفاده از یک نوک پیپت یا ابزار مخصوص، یک خط یا خراش (Scratch) در میان سلولها ایجاد میشود. با گذشت زمان، سلولها شروع به مهاجرت به سمت منطقه خالی میکنند تا زخم را پر کنند. این فرآیند به طور منظم با میکروسکوپ مشاهده و ثبت میشود. تست Scratch Assay برای مطالعه مکانیسمهای مهاجرت سلولی، بررسی اثر داروها یا مواد بر روی حرکت سلولها، و ارزیابی توانایی بهبود بافتها در تحقیقات پزشکی و بیولوژیکی کاربرد دارد.
برای انجام تست Scratch Assay، باید نوع سلول مورد نظر را مشخص کنید، زیرا نرخ مهاجرت در سلولهای مختلف متفاوت است. همچنین باید تعداد اولیه سلولها در هر چاهک یا صفحه کشت را تعیین کنید تا لایهای یکنواخت و مناسب برای ایجاد خراش تشکیل شود. محیط کشت و هر گونه مکملهای لازم (مانند سرم) باید مشخص شوند. اگر هدف بررسی اثر یک ماده خاص بر مهاجرت سلولی است، باید غلظتها و زمانهای تماس ماده با سلولها را ارائه دهید. علاوه بر این، باید زمانبندی مشاهده و ثبت تصاویر (مثلاً در ساعتهای ۰، ۶، ۱۲، ۲۴ و ۴۸) را تعیین کنید.
نتایج تست Scratch Assay به صورت گزارش کامل شامل تصاویر میکروسکوپی از منطقه خراش در زمانهای مختلف ارائه میشود. این تصاویر نشاندهنده پیشرفت مهاجرت سلولی و پر شدن منطقه خالی هستند. گزارش حاوی اندازهگیریهای کمی مانند درصد بسته شدن زخم در هر زمان و نرخ مهاجرت سلولی خواهد بود. علاوه بر این، در صورت بررسی اثر مواد مختلف، مقایسهای بین نمونههای درمانشده و کنترل انجام میشود. اگر درخواست شود، تحلیل آماری نتایج و نمودارهای مربوطه نیز در گزارش گنجانده میشوند. این نتایج به شما کمک میکند تا توانایی مهاجرت سلولی و اثر عوامل مختلف بر این فرآیند را به دقت ارزیابی کنید.
